Как и чем стирать мембранную одежду в стиральной машине — выбираем режим и порошок
Чем стирать мембрану в стиральной машинке
Как стирать вещи из мембраны в машинке
Как стирать вручную
Как стирать мембранную куртку: сушка и последующий уход
Зачем нужна пропитка для мембраны
Качественная мембранная ткань долговечная и удобная. Синтетические волокна материала покрыты полимерной пленкой, которая одновременно дает коже дышать и не пропускает холод. В такой куртке ты не замерзнешь, но и потеть внутри не будешь, даже если физическая нагрузка серьезная.
Из этой ткани делают горнолыжные куртки, костюмы для трекинга, детские комбинезоны, пуховики и другую специализированную одежду для спорта и повседневной жизни. Качественные вещи из материала производят такие компании, как «Рейма», «Крокид» и другие.
Мембранную одежду нужно стирать очень аккуратно. Есть несколько важных нюансов стирки в домашних условиях, однако не нужно думать, что лучше вообще не стирать такие вещи. Это тоже неправильно. К тому же хорошая стирка поможет увеличить срок пригодности изделия.
Специальные средства
Лучше всего для стирки подойдет специальное средство для мембраны. Его можно приобрести в любом спортивном магазине или там же, где покупалась куртка. Производители разрабатывают максимально щадящую формулу для очистки ткани без ее повреждения.
Если возможности использовать такое средство нет, то можем посоветовать взять любой гель для стирки в капсулах или даже жидкое мыло. Главное, чтобы у него был неагрессивный состав, который может повредить структуру материала. Внимательно посмотри, чтобы в составе не было указано содержание хлора, а также кондиционера, как, например, в «Ласке». Такие вещества способны ухудшить водоотталкивающие свойства верхней одежды — она становится на порядок холоднее и быстрее промокает.
Что будет, если мембрану постирать обычным порошком
Внешний слой, призванный отталкивать воду, не повредится, а вот маленькие частички порошка забьются в микроперфорации в материале, и он перестанет «дышать».
Если на вещи образовалось просто маленькое грязное пятно, не обязательно из-за этого затевать большую стирку, потому что одежду еще нужно будет сушить и гладить, а это достаточно трудоемкий процесс. Если сейчас не конец сезона, когда куртку нужно постирать и убрать до следующей зимы, то можно просто аккуратно потереть загрязнение с помощью щетки. Скорее всего, от пятна не останется следа.
Многие говорят о том, что лучше выбрать ручную стирку для такой деликатной вещи, но это вовсе не обязательно. При соблюдении всех рекомендаций даже в стиральном барабане одежда не испортится. Важно лишь помнить о мерах предосторожности.
- Не стирай вещи из мембраны при температуре выше 30-40 градусов. Высокий температурный режим может склеить синтетические волокна и безвозвратно испортить вещь. Тем более, его не вынесет краска, которой пропитан верхний слой.
- Перед стиркой убедись, что режим отжима отключен. Механические действия могут повредить материал, тем более внутри барабана. Лучше достать вещь и самостоятельно ее просушить.
- Не стирай одновременно, например, комбез и другие детские вещи. Грязь с них может весьма успешно впитываться материалом, так, что потом будет невозможно его отчистить.
- Если сама вещь немного в пыли или грязи, лучше перед стиркой стереть верхний слой, чтобы лишний раз не засорять барабан. Куртка также может плохо отстираться, если пропустить этот этап.
- Не лишним будет включить дополнительный режим полоскания. Особенно если ты стирала вещь обычным порошком. Можно попытаться таким образом спасти ситуацию.
- Перед стиркой не забудь застегнуть все застежки.
Не нужно стирать мембранную одежду чаще, чем раз в сезон. Она достаточно долго сохнет, к тому же есть шансы повредить материал. Ткань не впитывает пот, поэтому это не так необходимо.
Если ты все-таки опасаешься доверять вещь машинке, то можешь постирать ее самостоятельно. Для этого можешь взять даже обычное хозяйственное мыло без хлорки и кондиционеров.
Приготовься к тому, что действовать нужно быстро, потому что долгое замачивание и контакт с водой для куртки может обернуться ухудшением ее качества.
- Набери в таз воды температурой до 40 градусов. Она должна быть чуть теплая. После этого застегни все молнии на изделии и погрузи его в воду. С помощью мягкой щетки и мыла постарайся смыть основные загрязнения.
- Ни в коем случае не три сильно материал, не сжимай его, не мни и не отжимай, даже вручную. Из-за этого может повредиться верхний водоотталкивающий слой.
- В конце стирки прополоскай изделие под холодной водой.
На этом наши действия не заканчиваются. Первым делом нужно высушить изделие. Делать это можно исключительно в горизонтальном положении. Можно попробовать поместить вещь в стиральную машину или сушилку на самую минимальную температуру, если ты уверена, что там с материалом ничего не случиться, потому что ему противопоказано сильное нагревание.
Не пропустите
Не пропустите
Как привести пуховик в порядок после стирки: выбивалка для ковров, скалка и пылесос
Сразу после стирки дай воде просто стечь, а потом при комнатной температуре суши куртку на горизонтальной поверхности.
Ни в коем случае не помещай вещь из мембраны на батарею. Она может просто расплавиться. По такой же логике использовать утюги также не рекомендуется. В крайнем случае можно попробовать разгладить замявшийся материал через толстое полотенце, но, если ты все делала правильно при стирке, то такой ситуации возникнуть не должно.
Зачем нужна пропитка для мембраны
Для идеального ухода за материалом не хватает только последнего шага. После стирки, даже самой правильной, постепенно верхний водоотталкивающий слой может стираться. Поэтому в идеале после каждой стирки, то есть в конце сезона, использовать специальную пропитку. Ее также можно приобрести в магазине.
Она продается в жидком варианте, добавляется к гелю для стирки. Или же в форме спрея, который наносится уже после сушки. Кроме того, такие средства можно использовать для ухода за обувью из мембраны.
Не пропустите
Не пропустите
Как стирать шерстяные вещи, чтобы не испортить внешний вид
Пропитка необходима для того, чтобы сохранять первоначальное качество изделия и увеличивать срок его службы. Профессиональные спортсмены ухаживают за своей одеждой так, что она выдерживает любые нагрузки, именно благодаря такому многоступенчатому уходу.
Существуют удобные средства 2 в 1 — и стирка, и пропитка. Просто постирай по всем правилам изделие с таким средством, и защитный слой будет восстановлен автоматически без дополнительных действий. Очень удобно для тех, кто не хочет держать в голове много всего.
Теперь ты знаешь, как стирать мембранную одежду так, чтобы она прослужила тебе долгие годы. Это действительно очень хорошая покупка, потому что изделие при должном уходе способно не терять своих свойств в течение нескольких лет и сезонов. Особенно, если ты используешь ее не так часто.
Тем не менее, в частой стирке мембрана не нуждается, потому что большинство пятен можно удалить щеткой или губкой с поверхности, а ткань внутри не так сильно загрязняется. Поэтому не стоит злоупотреблять стиркой и закидывать вещь в машинку после каждой поездки на горнолыжный курорт или прогулки.
Автор
Кристина Иванова
Автор Lisa.ru
Какое впечатление произвела на вас эта статья?
Как стирать мембранную одежду (вручную, в стиральной машине)
Так как все быстро растет и развивается в нашем мире, то появилась новая замечательная мембранная одежда. Она довольно быстро вклинивается в нашу жизнь, особенно часто ее можно увидеть у наших спортсменов. Так же эту одежду можно увидеть на детях, потому как она удобна, легка и хорошо сохраняет тепло. Так что эту одежду приобретают достаточно много людей и у них со временем ее использования возникает вопрос, как стирать одежду из мембраны?
Что такое мембрана
Уход за мембранной одеждой отличается от ухода за обыкновенной одеждой. Мембранную одежду стирать обычным способом нельзя. Потому как она имеет отличия от одежды в привычном для нас понимании. Собственно, мембрана – сетка, ячейки которой не дают воде попасть ни в какую сторону. При этом она дает возможность телу дышать, так как не препятствует проникновению воздуха. Поэтому человек, носящий эту одежду, не будет в ней потеть. Так же она не дает проникнуть внутрь холодному воздуху и поэтому утеплители вроде «лебяжьего пуха» такой куртке не надо.
И чтобы не испортить стиркой такую довольно дорогостоящую вещь надо выяснить способы ухода за курткой с мембраной при помощи, которых можно избавиться от загрязнений на мембранной одежде.
Способы чистки мембранной одежды
Чтобы не испортить куртку с мембраной, необходимо ознакомиться с правилами, как правильно стирать мембранную одежду. Стирка обыкновенным порошком не подойдет, так как он очень быстро забьет ячейки, мембрана перестанет выполнять свои функции, и превратится во что-то наподобие резинового плаща. Поэтому на вопрос чем стирать мембранную куртку, можно с уверенностью ответить, что для этой цели берутся определенные составы для стирки и применяется щадящий режим в стиральной машине. Вот средства способные выстирать вещь из мембраны и не нанести ей ущерб:
- DOMAL Sport Fein Fashion – бальзам чтобы стирать одежду, предназначенную для спортивных тренировок, и он замечательно подойдет для ухода за мембранными вещами. Так как во время стирки бальзам не будет забивать ячейки сетки и сохранит ей жизнь;
- Nikwax Tech Wash – замечательное средство, которое способно убрать грязь с одежды и сохранить все свойства мембраны. Если первая стирка по незнанию была произведена обычным порошком, то это средство удалит из сетки частицы порошка и позволит мембране дальше заботится о комфорте своего хозяина;
- Denkmit Fresh Sensation – это доступный по цене гель, который удаляет грязь из мембраны, но, к сожалению, не способен продлить ей жизнь. И им стирать лучше только в редких случаях, если не будет в продаже выше описанных средств;
- Perwoll для спортивной одежды Sport & Active – это популярное средство, которое часто встречается в продаже и подходит для многоразовых стирок мембранной одежды.
- Хозяйственное мыло – если необходима стирка, а ничего другого под рукой нет, то это мыло просто уникальное средство. Его надо хорошо растворить в теплой воде так, чтобы не было комочков, и отправить в стиральную машину. Можно не бояться, что оно забьет сетку мембраны.
Важно знать, что применять средства, в составе которых есть хлор нельзя, так как он довольно быстро нарушает строение мембраны, и одежда будет испорчена.
Виды стирки мембранной одежды
Как стирать куртку или другую одежду? Собственно, стирать можно как руками, так и при помощи стиральной машины. Но прежде чем приступать к стирке надо:
- Извлечь из карманов все, что в них имеется.
- Отстегнуть мех.
- Застегнуть молнию.
Ручная стирка
Для этого берется подходящая по размеру пластиковая емкость и разводится в нем средство, любое из перечисленных выше. Вода нагревается не больше 30 градусов. Если при первой стирке грязь не отошла, то операцию можно повторить второй раз. При этом все полоскания делают в теплой воде.
Машинная стирка
Тут будет рассказано, как стирать мембранную одежду в стиральной машине. Применяя этот способ очищения от грязи надо быть предельно аккуратным, чтобы не повредить сетку мембраны. Поэтому кладут в барабан только по одной вещи, а не все сразу. Режим выбирается щадящий:
- Ручная стирка;
- Стирка изделий из шерсти;
- Стирка спортивных вещей (иногда встречается такой режим).
Внимание, нужно убрать режим отжима, который нанесет непоправимый вред мембране. И выставить температуру в 30 градусов.
Какой бы из способов не был выбран для стирки, надо так же знать, что вещь не стоит замачивать дольше, чем на 15 минут. Выбирая между ручной стиркой и в машине-автомат лучше отдать предпочтение ручной стирке. Так как это наверняка не испортит полезные качества мембраны. А грязь довольно легко отстает от ткани, если ее слегка аккуратно помять руками в еле теплой воде. Из опыта хозяек считается, что натуральное хозяйственное мыло намного лучше удаляет грязь с такой одежды, чем любые дорогостоящие средства. И не важно, хозяйственное мыло твердое или жидкое.
Уход после стирки
Как бы вещь была не постирана, отжимать ее нельзя, чтобы не повредить сетку. Мембранную одежду раскладывают горизонтально на столе, подложив под нее махровую простынь или полотенце, которое впитает лишнюю влагу. При таком способе сушки мокрое полотнище меняется несколько раз. И в таком положение одежда досушивается до полного просыхания, при этом в помещении должен циркулировать воздух, чтобы куртка не задохнулась.
Подвешивать на веревку или класть на трубы отопления нельзя. Есть еще вариант – повесить куртку на плечики и дать воде стечь в подставленный таз. Сушить на прямом солнечном свету такую одежду нельзя.
После полного высыхания желательно обработать одежду специальными аэрозолями по уходу за мембранной одеждой. Гладить такую одежду нельзя, хотя в этом необходимость и не возникает.
Обладая такой замечательной одеждой, нужно правильно за ней ухаживать, и тогда ее отличные качества сохранятся на долгое время. После такой стирки и сушки одежда упаковывается в специальный чехол для одежды и вешается в шкаф, до того момента когда она вновь сможет понадобиться.
Обычный порошок ниацинамида. Обзоры и ответы на часто задаваемые вопросы.
Краткий обзор The Ordinary Niacinamide Powder
- Текущая оценка 4,2/5 на веб-сайте Deciem
- Мишени
- Видимый блеск
- Расширенные поры
- Неровная текстура кожи
Купить
- Что такое обычный порошок ниацинамида и для чего он нужен?
- На что направлен порошок ниацинамида?
- Когда и как использовать The Ordinary Niacinamide Powder?
- С какими продуктами лучше всего смешивать этот порошок?
- Какие продукты нельзя смешивать с этим?
- The Ordinary Niacinamide Unboxing — подлинный
- Обычный ниацинамид Отзывы
- Какие продукты конфликтуют с The Ordinary Niacinamide Powder?
- Как узнать pH обычных продуктов?
- Часто задаваемые вопросы
- 20г. Проверьте цену в вашей валюте здесь.
Взгляд на обычную пудру ниацинамида
Компания Deciem любезно прислала пудру мне и всем модераторам группы Facebook перед датой запуска вместе с гиалуроновой кислотой The Ordinary. Порошок ниацинамида необходимо смешивать с продуктами на водной основе, и The Ordinary Hyaluronic Acid идеально подходит. Это симпатичный маленький горшочек, к которому прилагается маленькая ложка. Внимание! Держите ложку в коробке — я постоянно теряю ее.
Обычный порошок ниацинамида
При получении порошок ниацинамида должен быть запечатан (см. фото выше). Смешайте 1/4 ложки (это немного сложно) с 4 каплями продукта на водной основе. Я насыпала порошок на ладони, добавила гиалуроновую кислоту, потерла ладони друг о друга, а затем нанесла на лицо. Не было никакой шероховатости или мыльности, если вы не используете слишком много пудры. Это оставило ощущение кожи и выглядело очень хорошо. Я также смешала с Natural Moisturizing Factors, что тоже было прекрасно. Я нахожу обычную гиалуроновую кислоту немного липкой. Смешивание с NMF было приятнее.
Если вам нравится ниацинамид, вам понравится и это. Если вам нравится ниацинамид, но не нравится цинк, то вам это понравится. Стоит попробовать из-за цены, но, как всегда, наберитесь терпения, будьте последовательны и всегда читайте инструкции на официальной странице продукта.
Не смешивать с препаратами с pH 5 или ниже. Все уровни PH можно найти на каждой странице продукта. См. фото ниже.
Как определить pH продуктов The Ordinary
Порошок ниацинамида Ordinary нельзя смешивать с составами с pH 5 или меньше. Пожалуйста, пример того, где найти уровни ph ниже.
Вы можете найти уровни pH на всех страницах продуктов на веб-сайте The OrdinaryЧто такое порошок ниацинамида Ordinary и для чего он нужен?
Deciem говорит: Ниацинамид, также известный как витамин B3, является хорошо изученным, многогранным активным ингредиентом, который известен своими многочисленными преимуществами для кожи. Он способствует балансировке видимой активности кожного сала и поддерживает выработку компонентов, играющих центральную роль в структурной и функциональной целостности кожи.
100% порошок ниацинамида от The Ordinary предлагает наиболее прямое местное воздействие ниацинамида на видимый блеск, расширенные поры и неровную текстуру кожи. Этот формат порошка предлагает опыт «сделай сам», который позволяет персонализировать их использование в зависимости от их предпочтений. По сравнению с раствором ниацинамид 10% + цинк 1%, этот формат порошка предлагает пользователю универсальность в сочетании преимуществ ниацинамида с преимуществами других неконфликтующих технологий (таких как пептидные сыворотки) для решения нескольких проблем кожи одновременно.
Купить
Мишени порошка ниацинамида
- Видимый блеск
- Расширенные поры
- Неровная текстура кожи
Когда и как использовать The Ordinary Niacinamide Powder?
- Смешайте четверть мерной ложки прилагаемой ложки с 4 каплями средства на водной основе, которое вы будете использовать, на ладони.
- Отмерить четверть ложки довольно сложно. Было бы лучше сделать ложку еще меньше и просто наполнить ее.
- Наносить на лицо утром и/или вечером.
- Избегать попадания в глаза. В случае контакта тщательно промойте водой.
- Мойте руки после работы.
- Не смешивать с составами с pH 5 или ниже. Смотрите фото выше, где вы можете найти все уровни pH The Ordinary.
- При появлении раздражения смойте, прекратите использование и обратитесь к врачу.
- Использовать только по назначению на неповрежденной коже.
- Перед использованием рекомендуется протестировать пластырь.
- См. руководство по тестированию исправлений на веб-сайте The Ordinary
- Хранить в недоступном для детей месте.
С чем смешивать?
Deciem говорит: В своей истинной форме ниацинамид легко растворяется в воде и легко растворяется в продуктах на водной основе, таких как сыворотки и кремы.
Вы можете смешивать его с любым неконфликтующим средством на водной основе, при условии, что pH основы составляет от 5,1 до 7,0. Когда дело доходит до выбора основы на водной основе для смешивания с этой формулой, в рамках бренда The Ordinary доступно несколько вариантов. К ним относятся следующие:
- Гиалуроновая кислота
- Натуральные увлажняющие факторы
- Буфет + медные пептиды
- Матриксил 10% + ГК
- Раствор аргирелина
Вы заметите, что Buffet отсутствует в списке из-за его pH.
С какими продуктами НЕ следует смешивать его?
- Продукты с рН 5 или менее. (Смешать с продуктом с pH 5,1-7)
- Прямые кислоты
- L-аскорбиновая кислота
- Этилированная аскорбиновая кислота
- Производные витамина С
- Раствор аскорбилтетраизопальмитата
- Аскорбилглюкозид
- Аскорбилфосфат магния
Есть много продуктов, с которыми его нельзя смешивать. Тем не менее, вы можете продолжать использовать их в своей повседневной жизни , ЗА ИСКЛЮЧЕНИЕМ любой формы витамина С , которая включает производные. Эта информация была отправлена мне в Deciem.
The Ordinary Niacinamide Отзывы
The Ordinary Niacinamide Powder в настоящее время имеет оценку 4,2/5 на веб-сайте Deciem. Больше отзывов смотрите ниже, в Instagram и в группе Facebook.
Ниа: Мне это нравится. Я просто добавляю немного в NIOD SDSM на ладони. Лучше, чем 10%, без липкости.
Джен: Пока мне очень нравится! Пробовал с NMF — хорошая пара. Я лично не делал, так как он сочетался с гиалуроновой кислотой. В целом, еще слишком рано, чтобы узнать об эффекте, но я получаю удовольствие от его использования и снова чувствую себя химиком. 😁
Использовала его в увлажняющем креме для рук и груди.
Анна: Любовь или пока! Пользовался им каждый день. Я смешал его с гиалуроновой кислотой, сывороткой от Trader Joe’s (по консистенции очень похожа на ГК TO), и только что попробовал с альфа-арбутином. Я беспокоился, что он может быть песчаным, но обе смеси сразу стали гладкими и оставили ощущение увлажненности и шелковистости на моей коже.
Трейси: Люблю, люблю, люблю! Сегодня утром попробовала HA, но у меня на лице образовалась пена. Попробовал снова с аргирелином, и это было потрясающе.
Часто задаваемые вопросы об обычном порошке ниацинамида
Deciem задает вопросы и отвечает на них в социальных сетях.
Поскольку порошок имеет более высокую концентрацию, может ли он вызвать раздражение чувствительной кожи? Мы рекомендуем попробовать пробные патчи, чтобы узнать, понравится ли состав вашей коже.
В чем основное отличие порошка от сыворотки? Это обеспечивает наиболее прямое местное воздействие ниацинамида.
Если бы моя кожа плохо отреагировала на The Ordinary Niacinamide + Zinc, пудра была бы лучше? В качестве альтернативы вы можете изучить это! Мы рекомендуем применять пробные патчи, чтобы увидеть, как состав нравится вашей коже.
Вызывает ли обычный порошок ниацинамида раздражение чувствительной кожи? Мы рекомендуем попробовать пробный патч, чтобы узнать, нравится ли состав вашей коже.
Совместим ли он с другими активными веществами, такими как витамин С, ретинол или отшелушивающие кислоты? Мы рекомендуем избегать использования продуктов, содержащих аскорбиновую кислоту.
Можно ли смешивать ниацинамид The Ordinary с альфа-арбутином? Мы рекомендуем чередовать The Ordinary 100% Niacinamide Powder и The Ordinary Alpha Arbutin 2% + HA в разных процедурах.
Ca n Я смешиваю его с тоником на основе гликолевой кислоты? Мы рекомендуем чередовать The Ordinary Glycolic Acid 7% Toning Solution и The Ordinary 100% Niacinamide Powder в разных процедурах. Это связано с тем, что неизвестно, сколько порошка клиент будет растворять в прямой кислотной сыворотке. Таким образом, мы не можем с большой точностью судить, в какой степени кислая среда может влиять на химическое поведение ниацинамида. Поэтому в качестве меры предосторожности мы добавили Direct Acids в качестве конфликта. Напротив, сыворотка Niacinamide 10% + Zinc 1% имеет известное количество/концентрацию солюбилизированного ниацинамида.
Можно ли смешивать его с ретинолом и ретиноидами? Да
Можно ли смешивать со скваланом? Да
Совместим с вашей сывороткой с гиалуроновой кислотой? Да
Без цинка менее эффективен при гиперемии кожи? Функциональность ниацинамида не зависит от цинка. Ниацинамид сам по себе может воздействовать на видимую активность кожного сала и расширенные поры, улучшая при этом более гладкую текстуру кожи.
Можно ли смешивать The Ordinary Niacinamide с Matrixyl? Да, можно
Что такое конфликтные формулы? Ниацинамид нельзя использовать вместе с L-аскорбиновой кислотой и этилированной аскорбиновой кислотой или производными витамина С, поскольку ниацинамид может нарушить целостность этих форм витамина С.
Это лучше, чем сыворотка? Порошок ниацинамида от The Ordinary предлагает наиболее прямое местное воздействие ниацинамида. Этот формат порошка предлагает опыт «сделай сам», который позволяет персонализировать их использование в зависимости от их предпочтений. По сравнению с ниацинамидом 10% + цинком 1% от The Ordinary, этот формат порошка предлагает пользователю универсальность в сочетании преимуществ ниацинамида с преимуществами других неконфликтующих технологий (таких как пептидные сыворотки) для одновременного решения множества проблем кожи.
Как действует порошок ниацинамида и как его использовать? Ниацинамид водорастворим и легко растворяется в продуктах на водной основе, таких как сыворотки и кремы. 100%% ниацинамидный порошок The Ordinary можно смешивать с любым неконфликтующим средством на водной основе при условии, что pH основы составляет от 5,0 до 7,0. У нас есть несколько примеров продуктов, с которыми его можно смешивать, а также инструкции по применению на сайте theordinary.com.
Что такое ПАО обычного порошка ниацинамида?
Ниацинамидный порошок не содержит ПАО (период после вскрытия). На баночке и коробке есть срок годности.
Купить сейчас
Другие продукты Deciem с ниацинамидом
- Обычный ниацинамид + цинк
Эта страница является всего лишь руководством. Всегда читайте инструкции на официальной странице.
Руководство по Вестерн-блоттингу: Часть 7, Промывка мембран
Загрузить PDF
Промывка удаляет несвязанные или агрегированные белки, присутствующие на блоте, а также несвязанные реагенты, которые могут мешать обнаружению молекулы-мишени, и помогает уменьшить фоновый сигнал. Чувствительность анализа можно повысить, улучшив отношение сигнал/шум, что может обеспечить более точный анализ интересующего белка. В части 7 нашего руководства по вестерн-блоттингу подробно описаны передовые методы оптимальной промывки для лучших вестерн-блоттинга.
Обзор
- Процедура этапа промывки
- Выбор подходящего промывочного буфера
- Ссылки
Мембрану необходимо промывать после блокировки и между инкубациями с антителами. Промывка удаляет несвязанные или агрегированные белки, присутствующие на пятне, а также несвязанные реагенты, которые могут мешать обнаружению молекулы-мишени. Промывка помогает уменьшить фоновый сигнал, повысить чувствительность анализа за счет увеличения отношения сигнал/шум и сделать возможным качественный и количественный анализ интересующего белка. Следует использовать правильные реагенты для промывки в правильных концентрациях, чтобы обеспечить удаление вредных агентов из мембрана.
Процедура этапа промывки
- Обычно промывку проводят при комнатной температуре.
- Блот промывают, помещая мембрану в такой объем промывочного буфера, который полностью погружает мембрану. Например, для блота площадью 10 см² потребуется >40 мл промывочного буфера, мы обычно используем 100 мл.
- Мембрану инкубируют в промывочном буфере в течение 5-10 минут и постоянно встряхивают с помощью качалки или шейкера с платформой или подходящего блот-процессора.
- Затем процесс промывки повторяется между каждой инкубацией реагента.
Выбор подходящего промывочного буфера
Забуференный фосфатом солевой раствор (PBS)
Растворы PBS могут различаться по своему составу, но приближены к физиологическим условиям за счет объединения фосфата натрия и хлорида натрия для буферизации раствора до pH 7,5. Если целевой белок фосфорилирован или используется конъюгат щелочной фосфатазы (AP), следует избегать PBS, поскольку фосфат может взаимодействовать с фосфорилированными белками или подавлять активность AP, влияя на достоверность результатов.
Трис-буферный физиологический раствор (TBS)
TBS иногда используется в качестве промывочного буфера в качестве альтернативы PBS. Обычно его получают путем объединения Tris Base с Tris HCL и хлоридом натрия для создания раствора с физиологическим pH примерно 7,2.
Детергенты
Детергенты, такие как Triton X-100, SDS или Tween-20™, добавляются для предотвращения агрегации несвязанных белков. Липкие комплексы могут образовываться и связываться с мембраной, поэтому Tween-20™ обычно используется в концентрации от 0,05% до 0,1% по объему раствора.
Концентрации выше 0,1% могут лишить целевой белок (белки) мембраны и связанные с ними антитела, снижая сигнал и точность блота.
Предостережение: рост микробов может создавать фоновый сигнал
Буферы для промывки должны быть приготовлены свежими перед использованием.
Внимание! Блокирующие реагенты в промывочных буферах
Блокирующие реагенты иногда добавляют в промывочные буферы. Мы рекомендуем использовать только растворы буфера без добавления блокирующих белков, таких как сухое молоко или БСА.
Нашли полезной часть 7 нашего руководства по вестерн-блоттингу? Получите обновление, когда часть 8 будет доступна здесь
Ссылки
- Blancher C. et al. (2001). Методы SDS-PAGE и вестерн-блоттинга. Методы молекулярной медицины. DOI: 10.1385/1-59259-136-1:145.
- Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc. (2017). Вестерн-блоттинг Руководство по устранению неполадок! https://www. jacksonimmuno.com/secondary-antibody-resource/technical-tips/western-blot-trouble-shooting/
- GE Healthcare. (2011). Принципы и методы вестерн-блоттинга. https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma-Aldrich/General_Information/1/ge-western-blotting.pdf
- Басс Дж.Дж. и другие. (2017). Обзор технических аспектов применения вестерн-блоттинга в физиологических исследованиях. Скандинавский журнал медицины и науки в спорте. DOI: 10.1111/смс.12702
- Льюис М. (2018). Введение во вторичные антитела. Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc. https://www.jacksonimmuno.com/secondary-antibody-resource/technical-tips/whataresecondaryantibodies/
- Льюис М. (2016). Прямой и непрямой вестерн-блоттинг. Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc. https://www.jacksonimmuno.com/secondary-antibody-resource/immuno-techniques/directandindirectwesternblotting/
- Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc. (2020). Выбор подходящего вторичного антитела, очищенного с помощью аффинной хроматографии, для вашего приложения.